Arbeitspapier/Forschungsbericht

Jahr der Veröffentlichung: 2014

URL: https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:101:1-201502167952

Abstract: 

Im Projekt „Entwicklung eines effizienten Zwei-Enzym-Systems aus einer Arylalkohol-Oxidase und einer Peroxidase zum umweltschonenden und sicheren Aufschluss von Lignocellulose“ wurde eine Arylalkohol-Oxidase aus dem Basidiomyceten Pleurotus sapidus in drei verschiedenen Wirtsorganismen, dem Bakterium E. coli, der Hefe Hansenula polymorpha und dem Basidiomyceten Coprinopsis cinerea rekombinant dargestellt. Dabei konnten die höchsten Aktivitätsausbeuten von ca. 90 U L-1mit dem Basidiomyceten C. cinerea erzielt werden. Die Klonierung der für das zweite Enzym, eine Dyp-Typ Peroxidase (DyP) aus P. sapidus, kodierenden DNA, in C. cinerea verlief zwar positiv, jedoch konnten keine Aktivitätsunterschiede hinsichtlich des DyP spezifischen Substrates β-Carotin zwischen DyP-Transformanten und Kontroll-Transformanten festgestellt werden. Daher wurde für die Abstimmungsversuche des Zwei-Enzym-Systems die von der Firma AB Enzymes (Darmstadt, Deutschland) heterolog in T. reesei produzierte DyP verwendet. Dabei konnte nach Optimierungsversuchen gezeigt werden, dass das Zwei-Enzym-System das Ligninmodellsubstrat Syringol (DMP, 2,6-Dimethoxyphenol) über einen längeren Zeitraum oxidieren konnte als das einfache System bestehend aus der Peroxidase und dem benötigten Cofaktor H2O2. Das hinsichtlich Syringol optimierte Zwei-Enzym-System wurde anschließend auch zur technischen Bleichung von mit -Carotin gefärbter Molke eingesetzt. Auch hier zeigte sich der deutliche Vorteil gegenüber dem einfachen Enzym-System bestehend aus DyP und H2O2.

Harvard-Zitierstil: Zorn, H., Lauber, C., Galperin, I., Rühl, M., Suckow, M., Piontek, M., et al. (2014) Entwicklung eines effizienten Zwei-Enzym-Systems aus einer Arylalkohol-Oxidase und einer Peroxidase zum umweltschonenden und sicheren Aufschluss von Lignocellulose : Abschlussbericht zum Forschungsprojekt. Osnabrück: Deutsche Bundesstiftung Umwelt. https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:101:1-201502167952

APA-Zitierstil: Zorn, H., Lauber, C., Galperin, I., Rühl, M., Suckow, M., Piontek, M., & Piontek, M. (2014). Entwicklung eines effizienten Zwei-Enzym-Systems aus einer Arylalkohol-Oxidase und einer Peroxidase zum umweltschonenden und sicheren Aufschluss von Lignocellulose : Abschlussbericht zum Forschungsprojekt. Deutsche Bundesstiftung Umwelt. https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:101:1-201502167952